Altavilla D , F Squadrito , Bitto A , C Polito , Burnett PA , Di Stefano V , L Minutoli .

Fuente
Departamento de Medicina Clínica y Experimental y Farmacología de la Universidad de Messina, Messina, Italia.

Resumen

ANTECEDENTES Y OBJETIVOS:
Los flavonoides, catequinas y baicalina, de Scutellaria baicalensis y Acacia catechu, respectivamente, se han utilizado para diversas aplicaciones clínicas. Flavocoxid es un extracto mixto que contiene baicalina y catequina, y actúa como un inhibidor dual de la ciclooxigenasa (COX) y la 5-lipoxigenasa (LOX). Se investigó la actividad anti-inflamatoria, medida por expresión de la proteína y el gen de marcadores inflamatorios, de flavocoxid en macrófagos peritoneales de ratón estimulados con lipopolisacárido de Salmonella enteritidis (LPS).

ENFOQUE EXPERIMENTAL:
LPS-estimulado (1 microg.mL (-1)) macrófagos peritoneales de rata fueron co-incubadas con diferentes concentraciones de flavocoxid (32-128 microg.mL (-1)) o medio RPMI para diferentes tiempos de incubación. Inducible COX-2, 5-LOX, óxido nítrico sintasa inducible (iNOS) y la proteína inhibidora de los niveles de alfa-kappaB (IkappaB-alfa) fueron evaluados por análisis de Western blot. Factor nuclear kappa B (NF-kappaB) la actividad de unión fue investigado por el ensayo de movilidad electroforética cambio. Factor de necrosis tumoral-alfa (TNF-alfa) de genes y expresión de la proteína se midieron en tiempo real de reacción en cadena de la polimerasa y la enzima-inmunoensayo, respectivamente. Por último, malondialdehído (MDA) y los niveles de nitritos en los sobrenadantes de macrófagos fueron evaluados.

Principales Resultados:
La estimulación con LPS indujo un fenotipo proinflamatorio en macrófagos peritoneales de rata. Flavocoxid (128 microg.mL (-1)), inhibió la COX-2 (LPS = 18 + / – 2,1; flavocoxid = 3,8 + / – 0,9 intensidad integrada), 5-LOX (LPS = 20 + / – 3,8; flavocoxid = 3.1 + / – 0,8 intensidad integrada) y la expresión de iNOS (LPS = 15 + / – 1,1; flavocoxid = 4,1 + / – 0,4 intensidad integrada), pero no modificó la expresión de la COX-1. PGE (2) y LTB (4) los niveles en los sobrenadantes de cultivo se redujo en consecuencia. Flavocoxid también evitó la pérdida de la proteína alfa-IkappaB (LPS = 1,9 + / – 0,2; flavocoxid = 7,2 + / – 1,6 intensidad integrada), embotado aumento de NF-kappaB actividad de unión (LPS = 9,2 + / – 2; flavocoxid = 2,4 + / – 0,7 intensidad integrada) y la mejora de los TNF-alfa niveles de mRNA (LPS = 8 + / – 0,9; flavocoxid = 1,9 + / – 0,8 n-fold/beta-actin) inducida por LPS. Por último, flavocoxid disminución MDA, TNF y los niveles de nitrito de LPS-estimulado macrófagos.

CONCLUSIONES Y CONSECUENCIAS:
Flavocoxid podría ser útil como un potencial agente anti-inflamatorio, actuando en el nivel de expresión de genes y proteínas.